Расшифровка ПЦР анализа урогенитальных инфекций у женщин

ПЦР (полимеразно-цепная реакция) - на сегодня наиболее быстрый и точный метод выявления инфекций, позволяющий извлечь из сданного биологического материала ДНК микроба и идентифицировать его. ПЦР подходит для выявления практически всех возбудителей урогенитальной инфекции.

Для чего назначают исследование?

Выявление инфекционных болезней с помощью ПЦР-диагностики способствует высокоточному обнаружению ИППП. Наиболее высокая результативность анализа отмечается на ранних этапах развития инфекции, до момента возникновения симптомов болезни.

Среди преимуществ теста стоит выделить:

• достоверность исследования;
• быстроту выполнения анализа;
• высокую чувствительность к ДНК возбудителя инфекции.

ПЦР-диагностика позволяет точно установить присутствие в организме патогенов Ureaplasma, Chlamydia, Mycoplasma, Candida и прочих заболеваний.

Обследование предполагает проверку соскоба на имеющиеся инородные фрагменты ДНК, свойственные возбудителям урогенитальных инфекций. Тест способствует обнаружению патогена, его идентификации, а также анализу численности патогенной микрофлоры в организме.

Так как в основе ПЦР-диагностики лежит многочисленное удвоение конкретной зоны ДНК с применением в «in vitro» (искусственной) среде ферментов, по итогу синтезируется достаточное для визуального обнаружения количество фрагментов ДНК. Вместе с тем осуществляется размножение лишь той зоны, которая соответствует обозначенным условиям, и лишь тогда, когда возбудитель присутствует в диагностируемой пробе.

Специфичность данного метода достигает 100 %. С его помощью можно легко выявить патогена болезни даже при минимальном (несколько молекул) количестве его ДНК в тестируемом образце. Он эффективный в отношении патогенов с высокой степенью антигенной неустойчивости, а также внутриклеточных паразитов.

Результаты ПЦР диагностики

В ходе проведения ПЦР исследования могут быть обнаружены следующие возбудители:

• бактероиды (обнаруживаются при таких поражениях внутренних органов женской репродуктивной системы как сальпингоофорит, воспаление шейки матки, воспаление эндометрия);
• гарднереллы (патогены, вызывающие вагинальный дисбиоз);
• хламидии (бактерии, провоцирующие хламидиоз);
• микоплазмы (патогенные микроорганизмы, способствующие развитию микоплазменной инфекции);
• возбудитель цитомегаловируса (чреват патологиями развития плода при заражении матери в период беременности);
• токсоплазмы (провоцируют опасные для внутриутробного развития плода заболевания - герпес, краснуху, CMV, токсоплазмоз);
• вирус инфекционного мононуклеоза (возбудитель болезни Эйнштейна-Барра является основной причиной злокачественной лимфомы Ходжкина и лимфомы Беркитта; у некоторых людей, инфицированных мононуклеозом, заболевание не сопровождается никакими симптомами, поэтому очень сложно диагностируется);
• гонококки (провоцируют развитие гонореи, которая поражает органы урогенитального тракта);
• ВПЧ (способствует появлению остроконечных кондилом и Human Papillomavirus);
• трихомонады (поражают уретру и влагалище);
• вирус простого герпеса 1-го, 2-го типов;
• уреаплазмы (относятся к разряду условно-патогенной микрофлоры, приводят к уреаплазмозу и ряду других ЗППП, иногда диагностируются у абсолютно здоровых людей);
• мобилункус (провоцируют гарднереллёз бактериального происхождения);
• микоплазмы (вызывают воспаление придатков, матки, а также негонококковый уретрит).

В норме в пробе исследуемого биоматериала (соскобе) не должно содержаться фрагментов ДНК каких-либо инфекционных агентов, специфичных для ИППП.

При наличии в образце частей ДНК, специфичных для возбудителя хламидии, гонококка, токсоплазмы, микоплазмы, вируса Эйнштейна-Барра, хламидии, бактероидов, гарднереллы, трихомонады, ВПЧ, уреаплазмы, вируса простого герпеса 1, 2 типов, мобилункуса, цитомегаловируса, результат теста содержит информацию относительно наличия возбудителя («обнаружено») и его количества.

При отсутствии инфекции в бланке результатов указан тип патогена и сведения «не обнаружено».

Обратите внимание! Позитивные тесты высокочувствительным методом ПЦР на кандидоз всегда нужно сопоставлять с заключениями других медицинских обследований, а также с клиническими признаками болезни, т. к. у некоторых женщин незначительное количество данных микроорганизмов (вариант нормы) имеет место обитать во влагалищной среде.

Показания к проведению исследований

Область забора образца биоматериала (соскоба) для анализа определяется с учётом предполагаемой зоны обитания патогена. Как правило, у женщин мазок берётся из эндоцервикса, шейки матки и влагалища. Однако в зависимости от имеющихся у пациентки жалоб и клинических признаков болезни, соскоб может браться с какого-то одного участка (на усмотрение врача).

Взятие соскоба должно осуществляться в фазу обострения. Объём образца, отбираемый для диагностики, должен быть незначительным (с головку спички), поскольку в совокупности с возбудителем инфекции в пробу могут попадать соединения, замедляющие ПЦР, либо способствующие распаду ДНК в момент транспортирования образца и его хранения.

Наиболее подходящим инструментом, который позволяет аккуратно и безболезненно взять соскоб для исследования, является гинекологическая щёточка (урогенитальный зонд одноразового применения). Он позволяет отобрать образец нужного количества без его впитывания, не оказывая при этом травмирующего воздействия на слизистую. Также с помощью зонда проба удобно переносится в жидкую среду транспортного контейнера.

Готовясь к сдаче анализа, пациенткам следует учитывать некоторые особенности:

1. Сдавать мазок нужно в стадии обострения болезни и не ранее, чем через 21 день после полового акта без использования презерватива.
2. Закончить курс лечения антибактериальными препаратами за месяц до диагностики.
3. Накануне обследования (за 36 часов до манипуляции) нежелательна половая близость.
4. Во избежание получения недостоверных результатов тестирования анализ не проводится во время любых кровотечений из мочеполовых путей и менструации.
5. Повторное обследование с целью уточнения диагноза или контроля эффективности лечения проводится не ранее, чем через месяц после первичного скрининга.

В день взятия соскоба на возможные урогенитальные инфекции важно:

• не мыть половые органы, не спринцеваться, не проводить их обработку антибактериальными и дезинфицирующими средствами;
• следить, чтобы последнее мочеиспускание осуществлялось не ранее 3-х часов до взятия пробы на анализ;
• контролировать, чтобы мазок был взят через 1-2 суток после окончания менструации;
• за месяц до диагностики прекратить вагинальный ввод лекарств;
• за 10 суток до забора биоматериала следует воздержаться от различных лечебных процедур и употребления противоопухолевых медикаментозных средств.

При риске подозрения рецидива болезни диагностику урогенитальных инфекций рекомендуется проводить не ранее чем через 14 дней. Получение искажённых результатов при пцр  анализе наблюдается не так часто, чем при других диагностических методиках.

Как проводят анализ методом ПЦР: описание процедуры

При соблюдении правил взятия соскоба на анализ и специфики выполнения исследования ПЦР-диагностика очень точная. Тест позволяет выявить инфекцию даже при минимальном количестве частиц ДНК.

Анализ предусматривает:

• забор биоматериала у пациентки (соскоб берётся из мочеиспускательного канала, шейки матки и цервикального канал согласно технике взятия образца, установленного правилами конкретной лаборатории);
• помещение полученной пробы в реактор (соединение, предназначенное для выявления ДНК, РНК фрагментов возбудителя инфекции);
• синтезирование образца с применением ферментов, в ходе которого осуществляется цепная реакция;
• идентификация патогена (возможна только в случае достаточного числа копий молекулы).

Интерпретация результатов обследования не является сложной в трактовке: тест будет или позитивным, или негативным. Положительный анализ указывает на наличие возбудителя болезни. В бланке результатов диагностики обозначается название и количество выявленного патогена инфекции.

Что может выявить анализ?

Тест ПЦР способен выявлять присутствие в организме продолжительно размножающихся возбудителей без надобности применения тяжёлых микробиологических анализов, что весьма ощутимо в гинекологической практике при необходимости диагностирования половых заболеваний инфекционного генеза.

Хорошие результаты ПЦР анализ показывает при выявлении тяжело выращиваемых, некультивируемых, а также незаметно размножающихся разновидностей патогенов, которых регулярно приходится обнаруживать при бессимптомном носительстве инфекции и хронических формах ЗППП, т. к. данный метод предусматривает предотвращение возможных осложнений, связанных с культивированием такой микробиоты в условиях лабораторной среды.